CASY，不仅是细胞计数的利器，还在细胞存活率和毒性测量方面大显身手。最新研究揭示了它在评估抗癌药物的细胞毒性方面的潜力，为设计更有效的多药治疗方案带来了新思路。
在最近的一项名为“CASY在癌细毒性和化疗敏感性中的应用——抗癌药物组合治疗癌症”的研究中，CASY被用于评估抗癌药物结合化疗的细胞毒性，旨在设计具有更宽治疗窗口的新型多药治疗方案。
研究案例：新药物组合的细胞毒性评估
在Weinreich等人最近的一项研究中（1）。作者检查了接受胃癌标准三联药物方案（ECF）以及新型双联药物（D-D）多化疗方案治疗胃腺癌细胞系和非恶性细胞系。
使用CASY生长抑制测定评估了药物组合的效果：400 μL稀释后的细胞悬液重复测量三次，药物的细胞毒性效应被计算为实验开始时活细胞数量与经过各种药物组合孵育5、10和14天后的细胞计数之间的相对比例。CASY评估窗口设置为仅包括活细胞，并且排除死细胞。
来自德国图宾根大学医院实验肿瘤学的 J. Weinreich 博士：使用CASY进行细胞毒性测定能够快速、简单且可靠地评估抗癌药物疗法及其后续癌细胞系的化疗敏感性。CASY的一个主要优势是通过简单的细胞系特异性设置可以屏蔽分析中的碎片和死细胞，仅考虑活细胞及其聚集体。然而，由于记录了细胞的完整状态，所以死细胞和细胞碎片的数据在任何时候都是可用的。
1.体外生长曲线
图1：ECF对于胃癌细胞系(MKN-45和23132/87)与非恶性细胞系(NHDF和23132/87)的生长抑制是剂量依赖型的,抑制效果不显著
2.使用多种组合化疗方案处理细胞14天后的增长率
图2：单独使用D-D来作用于胃癌细胞系MKN-45和23132/87，其抑制效果不显著，而且对于非胃癌细胞系的NHDF和CCL-241作用不抑制反而促进。EC D-D对于胃癌细胞系MKN-45的抑制效果显著，对于非胃癌细胞系的抑制效果不显著
3.MKN45的细胞计数
图3：Day 0，实验开始。存活率=95.6%，活细胞浓度为2.7×106/mL。图解：LML:活细胞数/mL；VIA:%存活率；AGG:聚集；CL，CR：评估游标；NL，NR：标准化游标
图4：Day 7,PBS对照组。活率=90.3%；活细胞浓度为7.6×106 /mL
图5：MKN45细胞计数的CASY截图。Day 7，0.86 μmol/L D-D。活率=92.4%；活细胞浓度9.5×105 /mL
图6：使用EC D-D处理后的MKN-45细胞的细胞增长曲线。
red: E=0,37; C=0,45; D-D=0,41 μmol/L
pink: E=0,15; C=0,18; D-D=0,16 μmol/L
blue: E=0,075;C=0,09; D-D=0,082 μmol/L
yellow: PBS control
结果
评估新药物组合。大体上，通过CASY分析能够监控细胞系对联合药物方案的类型和数量的特异性化学敏感性。一种新的双联药物（D-D）（替代标准ECF组合中的5-FU）已显示出对恶性胃腺癌细胞系的效果比对非恶性细胞系的效果更好，有望成为胃腺癌治疗的前沿替代方案。
结论
CASY细胞计数和细胞毒性分析显示，一种新的EC D-D抗癌药物疗法有望成为胃腺癌治疗的前景替代方案，取代了标准的ECF三联药物组合。通过CASY分析，我们揭示了胃癌和非恶性细胞系对各种药物组合的敏感性差异，从而评估了药物混合物的抗癌潜力。
启示
CASY分析的高度特异性化学敏感性为研究人员提供了深入了解药物组合对不同细胞系影响的机会，为精准治疗的发展贡献力量。
参考文献✦
1. Weinreich J, Archid R, Bajaeifer K, Hack A, Königsrainer A, Schott TC.Growth and Chemosensitivity of Gastric Adenocarcinoma and Non-Malignant Cell Lines in Response to Novel Anti-Cancer Drug Combinations. Chemotherapy. 2014; 60(5-6):346-352.
NCBI中的文献索引号：DOI: 10.1159/000438943.
