实验室必须使用高质量的产物才能在多肽药物的早期研发中取得成功。然而,合成后获得的多肽纯度往往不够,因此,多肽纯化成为多肽实验室工作流程中的必要步骤,通过多肽纯化提高产物的纯度。但是在处理多肽或多肽文库时,这是一项极具挑战性的任务。本文将讨论纯化多肽和构建多肽文库在药物发现和筛选中的重要性。
肽是长度超过两个氨基酸的短蛋白质片段。肽在各种研究应用和药物开发过程中,尤其是在生物制药行业中至关重要。目前市场上已有 100 多种基于多肽的药物或诊断方法获得批准。1 多肽可以通过化学方法合成。主要的方法是固相肽合成(SPPS),通过一个氨基酸的羰基碳与另一个氨基酸的氮原子之间形成的酰胺键,在形式上失去水分子的情况下,将相应的氨基酸依次偶联。然而,合成过程会产生含有截断、缺失、溶剂、盐和其他有机碎屑等杂质的粗肽。 随着多肽长度的增加,截短和缺失会成为更重要的杂质来源。例如,如果 30 个单链肽的耦合效率为 99%,则会形成超过 25% 的截断。 01 分析可靠性
截断肽和其他副产品(溶剂、盐、有机残留物)等杂质会干扰测试系统,导致结果偏差,从而难以得出有意义的结论。2 肽纯化可消除这些污染物,确保更高水平的可靠性。
02 实验的高精确度高准确度
在药物发现和筛选过程中,精确度对于理解多肽与靶分子的相互作用及其在各种生物系统中的作用至关重要。因此,研究人员必须使用能准确代表他们打算研究的序列的材料。3
03 不同实验之间的一致性
保持研究的一致性对于可重复性和比较分析至关重要。具有明确纯度水平的多肽可确保您的实验以统一的序列进行,从而减少批间数据的变异系数。这种一致性简化了在不同研究项目和实验室之间复制实验和比较结果的过程,使您的工作更加高效可靠。4
04 长期成本效益
虽然纯化过程可能会给您的研究增加一些初始步骤,但从长远来看,它可以为您节省时间和资源。纯化多肽可降低重复实验或因结果不准确而进行代价高昂的调整的风险。在纯化方面的投资最终可以确保您的研究高效进行。
05 符合期刊标准
研究人员往往面临严格的发表要求。同行评审期刊需要高质量的多肽来满足其质量标准。通过在研究中采用纯化多肽,您可以确保数据的完整性,并满足这些合规要求。这将提高您研究的可信度,并确保其符合行业******实践。
PurePep EasyClean (PEC) 技术目前是一种全新的可以高效进行多肽纯化的技术,利用这项技术无需HPLC即可获得平均纯度高达85%的多肽,并且从研究到生产,可以适应各种规模下进行快速、持续的多肽纯化。 该技术的核心是使用了一种新开发的可裂解连接分子(PEC Linker RC+)以及修饰琼脂糖珠(Agarose100),基于捕捉和释放(Catch-and-release)的方法来进行多肽纯化。 它打破了传统多肽生产的障碍,基于化学选择性分离的方法,可以轻松分离杂质,还可以进行平行纯化,一次并行纯化甚至96个多肽。并且该技术相较于传统的色谱法纯化多肽,它可以有效纯化困难的肽(长肽、聚集肽和疏水性肽),有机溶剂的消耗也极大减少。值得一提的是,PEC纯化技术还可以和多肽合成仪联用,无需购置额外的多肽纯化设备即可在一台仪器上实现多肽高效合成与纯化。 在竞争激烈、要求苛刻的多肽筛选和药物发现领域,纯化多肽的重要性怎么强调都不为过。足够的多肽纯度可确保准确性和一致性,使科学家和研究人员能够放心地进行实验。从长远来看,使用纯化多肽不仅能保证数据的完整性,还能节省时间和资源。 这就是为什么选择合适的多肽合成和纯化解决方案能使您的研究工作与众不同。让纯化多肽成为您药物发现和筛选工作的关键,从而达到新的高度。您的突破性发现之路将始于纯化多肽的纯度和精度。 参 考 文 献 1. Vera D'Aloisio et al., Drug Discov. Today 2021, 26, 1409-1419 2. J. W. de Beukelaar et al., Rapid Commun. Mass Spectrom. 2007, 21, 1282-1288 3. J. R. Currier et al., Clin. Vaccine Immunol. 2008, 15, 267-276 4. A. N. Hofnagel et al., Clin Chem. 2016, 62, 48-69